生命科学研究

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田学辉, 黄丽芳, 周柳, 吴尧晶, 刘克明

生命科学研究. 2017, 21(5): 377-381.

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摘要: 以绒毛皂荚(Gleditsia vestita Chun et How ex B. G. Li)种子为外植体, 通过愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、生根和驯化移栽, 建立了绒毛皂荚组织培养的快速繁殖体系。结果表明: 1) 绒毛皂荚子叶和胚轴在MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+IAA 0.3 mg/L培养基上同步诱导出愈伤和芽, 愈伤组织诱导率达到90.5%, 同步分化率高达77.9%; 2) 不定芽增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L, 培养20 d后, 增殖倍数为4.0; 3) MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.25 mg/L条件下, 生根率高达100%, 且移栽后植株长势好, 成活率达90%以上。

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以Aβ4-11为免疫原制备Aβ1-42多克隆抗体

张松江, 赵献敏, 王权, 吕明惠, 苏少华

生命科学研究. 2017, 21(5): 382-385.

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摘要: β淀粉样蛋白1-42 (β amyloid 1-42, Aβ1-42)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的主要致病蛋白, 其抗体一直处于研发当中。现以Aβ4-11耦联KLH免疫2月龄雌兔, ELISA检测雌兔免疫血清中所产生的抗Aβ4-11 IgG滴度, Protein G-琼脂糖亲和层析纯化IgG, Bradford方法进行IgG蛋白含量测定, SDS-PAGE进行IgG纯度测定, 最后运用所制备的多克隆抗体采用免疫组化的方法分别对正常小鼠和9月龄APP转基因小鼠进行老年斑的检测, 以鉴定此抗体对Aβ1-42的特异性及亲和力。结果显示Aβ4-11具有良好的体液免疫原性, 而且以其为免疫原制备的抗体对Aβ1-42表现出良好的特异性及亲和力。结果表明, 以Aβ4-11亚单位片段为免疫原制备的Aβ1-42多克隆抗体, 可以作为AD的一种有效研究工具, 同时也为AD的诊断和治疗提供了一种新的可能。

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全细胞膜片钳研究离体小鼠内侧膝状体亚核神经元电生理特性

杜小凤, 贾慧娟, 王欣

生命科学研究. 2017, 21(5): 386-391.

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摘要: 内侧膝状体(medial geniculate body, MGB)是听觉通路在丘脑的重要中继站, 为了探究小鼠MGB亚核神经元的电生理特性, 使用离体全细胞膜片钳技术记录到99个MGB神经元, 其中腹侧核(ventral division of MGB, MGBv)神经元36个, 背侧核(dorsal division of MGB, MGBd)神经元34个, 内侧核(medial division of MGB, MGBm)神经元29个。结果表明, 神经元对去极化电流的反应具有爆发型(bursting) (16.2%, 16/99)和紧张型(tonic) (83.8%, 83/99)两种发放模式, 并且所有MGB神经元在超极化电流刺激结束后均有去极化反弹(rebound), 而仅有少数神经元(17.2%, 17/99)在超极化刺激过程中有超极化激活的内向电流(hyperpolarization-activated inward current, Ih)。此外, MGB各亚核神经元的静息膜电位(resting membrane potential, RMP)和激活阈值(active threshold)存在显著性差异(P<0.05)。以上表明MGB各亚核的电生理特性存在差异, 该结果有助于理解MGB各亚核在听觉信息处理中产生不同功能的原因。

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大腹园蛛鞭状腺蛛丝蛋白N端结构域的克隆表达及圆二色谱分析

李雪, 陈格飞, 张晓玲, 孟清

生命科学研究. 2017, 21(5): 392-398.

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摘要: 鞭状腺蛛丝是6种蛛丝中延展性最好的丝, 由鞭状腺蛛丝蛋白(FlSp)构成, 具有极大的潜在应用价值。目前, 有关FlSp的末端功能模块(NT和CT)编码基因的报道极少, 且其结构和功能均尚未明确, 这在一定程度上限制了鞭状腺蛛丝的仿生。现利用5′-RACE的方法, 以大腹园蛛总RNA和基因组DNA为模板, 首次获取了大腹园蛛FlSp NT模块(FlSp_A.v-NT)的完整编码基因, 并对其成功进行了克隆、表达及纯化, 产量可达60 mg/L; 同时, 利用圆二色谱(circular dichroism, CD)对FlSp_A.v-NT的二级结构进行了分析, 结果显示其主要以α螺旋构象存在, 这是首次对FlSp NT的二级结构进行探索, 为后续FlSp NT结构功能的研究提供了材料, 奠定了研究基础。

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拟南芥LecRK-ConA基因突变体的筛选鉴定及其功能初步研究

何壮, 李金燕, 张骋, 肖文君, 刘书灿, 李美玲, 郭新红

生命科学研究. 2017, 21(5): 399-404.

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摘要: 植物凝集素类受体激酶(lectin receptor-like kinases, LecRLKs)在植物抗逆性、激素信号转导及生长发育调节等方面扮演重要角色。LecRK-ConA基因是拟南芥LecRLK基因家族中的一员。利用三引物法鉴定获得LecRK-ConA基因两个缺失突变体的纯合子。启动子顺式作用元件分析显示, LecRK-ConA具有多个与干旱、光、赤霉素(gibberellic acid, GA)等应答相关的元件。实时定量PCR结果表明: LecRK-ConA基因具有组织表达差异性, 且在春化后4 d的种子中表达量最强, 用NaCl和甘露醇处理均能抑制该基因的表达。用NaCl和甘露醇处理缺失突变体lecrk-cona和Col-0后, 发现lecrk-cona的种子萌发率显著低于野生型。此外, 突变体lecrk-cona相对野生型Col-0来说, 具有早花现象。上述实验结果为进一步深入研究LecRK-ConA基因在抗逆与开花调控途径中的生理功能奠定了基础。

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山核桃叶总黄酮抑制TBBPA诱导斑马鱼胚胎发育毒性的研究

金位栋, 杨苏文, 孙丰超, 丁志山, 闫玉红, 杜家慧

生命科学研究. 2017, 21(5): 405-411.

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摘要: 四溴双酚A (tetrabromobisphenol A, TBBPA)是新型高关注度污染物之一, 对鱼类具有强毒性。山核桃叶中的黄酮类化合物具有抗氧化和抗细胞凋亡等作用。通过硅胶柱洗脱、薄层色谱(TLC)检测对山核桃叶进行提取和纯化, 得到黄酮类化合物产物B; 设置4个实验组(空白对照, 0.5 mg/L TBBPA, 1.0 mg/L产物B, 0.5 mg/L TBBPA和1.0 mg/L产物B), 记录斑马鱼胚胎发育过程中的形态学指标; 同时, 检测不同处理组中活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平和凋亡相关基因的表达情况。结果发现, 山核桃叶提取的总黄酮产物B中包含50%的查尔酮、27%的黄酮或者黄酮醇、18%的二氢黄酮或者二氢黄酮醇、5%的异黄酮等22种黄酮类化合物; 富含黄酮类化合物的产物B对TBBPA诱导斑马鱼胚胎的卵凝结率、畸形率及32 h血流障碍等指标具有显著降低作用; 可显著抑制TBBPA诱导的ROS水平升高; 对TBBPA诱导的凋亡基因p53上调和Bcl-2下调均有显著改善作用。实验结果表明山核桃叶总黄酮通过降低ROS水平, 抑制凋亡基因的异常表达, 发挥抗氧化和抑制凋亡作用。实验结果有助于了解山核桃叶有效成分总黄酮对TBBPA诱导的斑马鱼胚胎毒性的保护作用, 为水生态系统和人体健康危害的防治提供新思路。

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不同环境因素对拟环纹豹蛛捕食猎物效率的影响

钟文涛, 谭昭君, 汪波, 颜亨梅

生命科学研究. 2017, 21(5): 412-416.

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摘要: 利用农田天敌与害虫的捕食关系进行生态防治的控虫方式有利于环境保护和食品安全。蜘蛛是农业生态系统中一类主要的捕食性天敌, 而环境因素直接影响蜘蛛的捕食效率。通过采用单因素分析法和三因素三水平正交设计法, 从光照强度、光照颜色、环境温度3个宏观角度对影响拟环纹豹蛛捕食效率的环境因素进行了分析。研究结果显示, 拟环纹豹蛛捕食在环境因素组合为光照强度15 lx、环境颜色绿色、环境温度27 ℃时, 捕食效率最高。

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江西都昌保护区越冬水鸟群落多样性及种多度

吴庆明, 孙雪莹, 黄显, 姚茂林, 陈川, 黄晓凤, 李跃, 陈荣春, 杨亿沫, 隋媛

生命科学研究. 2017, 21(5): 417-423.

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摘要: 2015年12月至2016年1月, 采用定点直接计数法对江西都昌保护区越冬期湿地水鸟群落的物种多样性和种多度进行了监测分析。结果显示: 1) 共记录在都昌保护区越冬的湿地水鸟6目11科28种, 以雁形目、鸻形目、鹳形目鸟类为主(75.00%), 其次为鹤形目、目(21.42%); 古北种占绝对优势(78.57%), 其次为东洋种(14.29%); 冬候鸟为主(78.57%), 其次为留鸟(21.43%); 涉禽(57.14%)和游禽(39.29%)居多; 绝大部分湿地水鸟种类受到关注, 35.71%的鸟种处于受胁状态, 57.14%的鸟种已引起关注并被列入保护名录中; 2) 鸟类群落的多样性指数为0.758, 均匀度指数为0.228; 3) 对数正态分布模型模拟的鸟类群落的种多度关系呈对数正态分布, 符合鸟类群落常见性与罕见性分布的特性。

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北方硕螽不同时期受精囊的组织学结构观察

芦荣胜, 高文娟, 李柯, 耿建勋

生命科学研究. 2017, 21(5): 424-428.

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摘要: 应用光学显微镜和扫描电子显微镜技术对北方硕螽(Deracantha onos Pallas) 6龄若虫、未交配和交配成虫3个时期受精囊的组织学结构进行了比较研究。结果显示, 6龄若虫受精囊上皮层细胞处于增殖状态, 各种细胞的形态不易区分; 未交配成虫的受精囊上皮层细胞已初步分化, 分布层次不明显, 上皮层端部出现颗粒物; 已交配成虫的受精囊分化出上皮细胞、腺细胞和导管细胞3种细胞类型, 分布层次明显, 颗粒物消失, 腺细胞分泌腔呈现多态性。此外, 已交配受精囊内表面分布有棘和导管细胞的导管开口, 其形态均存在区域性差异。研究表明交配活动可能诱导了腺细胞的分泌活性, 在受精囊不同区域腺细胞和棘可能行使不同的生理功能。

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Ⅲ型登革病毒在THP-1细胞上的ADE模型建立

姜黎明, 杨佳佳, 罗佳, 叶超, 文送娇, 孙强明

生命科学研究. 2017, 21(5): 429-432.

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摘要: 登革热(dengue fever, DF)是由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型登革病毒(dengue virus, DENV)引起的急性传染病, 抗体依赖增强感染(antibody-dependent enhancement, ADE)是自限性的登革热以及危及生命的登革出血热(dengue hemorrhagic fever, DHF)或登革休克综合症(dengue shock syndrome, DSS)等重症的主要原因。采用不同稀释度的Ⅱ型登革病毒prM前膜抗体与分离自云南西双版纳重症病人的Ⅲ型登革病毒复合感染THP-1细胞, 通过实时荧光定量PCR发现亚中和浓度prM前膜抗体诱发THP-1细胞液中更高浓度的病毒载量。在THP-1细胞系上的研究可为后续研究登革病毒ADE打下坚实的基础。

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小干扰RNA抑制APP的表达对鼻咽癌CNE2细胞增殖和迁移的影响

赵师, 王永强, 刘芬, 汤参娥

生命科学研究. 2017, 21(5): 433-436.

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摘要: 为了探索淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein, APP)在人鼻咽癌CNE2细胞中的生物学功能, 采用脂质体Lipofectamine 2000为载体将靶向APP的siRNA转染CNE2细胞, 同时设置无义序列为阴性对照组, 利用免疫荧光及Western-blot分别检测转染效率和APP蛋白水平的表达, 采用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)和细胞划痕实验检测CNE2细胞的增殖与迁移能力。结果显示: 干扰组的APP蛋白表达水平明显低于对照组, 差异有统计学意义(P<0.05); 干扰APP可抑制CNE2细胞的增殖和减缓划痕的愈合。以上结果提示应用siRNA干扰技术能有效降低鼻咽癌CNE2细胞APP蛋白表达, 抑制细胞增殖和迁移能力, 为鼻咽癌的基因治疗提供了新思路。

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丹参酸甲对小鼠骨髓来源树突状细胞表型及其部分功能的影响

马效雷, 于晓锋, 牛文堂, 马文华, 马文翠, 胡涛

生命科学研究. 2017, 21(5): 437-441.

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摘要: 探讨丹参酸甲对小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cells, DCs)表型及其部分免疫功能的影响, 可为丹参酸甲的临床应用提供理论和实验依据。首先, 分离培养小鼠骨髓细胞, 并利用IL-4和GM-CSF诱生树突状细胞。随后, 进行丹参酸甲体外处理, 采用流式细胞术检测丹参酸甲对树突状细胞百分率、细胞表面分子(MHC-II、CD80、CD86)表达水平及摄取能力的影响; 采用ELISA检测各组DC与T细胞共培养后上清液中细胞因子的含量。结果显示: 经10 μg/mL丹参酸甲处理后, 树突状细胞的百分率、FITC-Dextran阳性细胞的数量明显增加, 而其表面分子MHC-IIhigh/MHC-IIlow比例、MHC-IIhigh和MHC-IIlow平均荧光强度、CD80和CD86的表达水平均显著降低。此外, 丹参酸甲可增强DC诱导的T细胞分泌IL-10的能力, 同时抑制T细胞分泌INF-γ的能力。以上结果说明, 丹参酸甲可诱导骨髓细胞向DC分化; 并可通过增强DC对抗原的摄取吞噬能力, 下调成熟DC的表面标志物表达水平, 抑制树突状细胞的成熟, 减轻DC与T细胞相互作用介导的炎症反应。这为丹参酸甲在临床用于T细胞过度活化引发的免疫性疾病提供了依据。

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快速PCR方法在法医DNA检验中的研究进展

韩俊萍, 李洋, 马原, 尚蕾, 李彩霞, 孙敬

生命科学研究. 2017, 21(5): 442-449.

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摘要: 目前法医DNA检验应用的短串联重复序列(short tandem repeat, STR)复合扩增系统均依赖于荧光标记的多重PCR方法。常规DNA检验流程包括提取、定量、扩增、分离和检测, 而多重PCR扩增常常是整个过程中的限速步骤, 完成28~30个循环大约需要3 h。以往常利用商业化的热循环仪和热稳定DNA聚合酶, 但需要很长的PCR循环时间才能够确保100~400 bp的目标片段得到有效且均衡的复合扩增。随着各种缩短扩增时间方法的出现, STR复合扩增不再需要3 h, 而是可以减少到几十分钟甚至十几分钟。现主要总结了快速PCR、直接PCR、芯片PCR以及其他快速扩增等方法的研究现状与进展, 尤其是在法医DNA检验领域, 同时对比了几种常见快速PCR扩增方法, 可见缩短扩增时间对DNA检验的意义重大。未来, 以芯片为主导、快速检验为目的的全自动、便携式、集成化的DNA分析系统, 将使得法医DNA检验从实验室走进案件现场, 甚至日常生活, 实现真正的快速即时检验。

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核糖体蛋白S26的研究进展

王枭宇, 梁超, 方肇勤

生命科学研究. 2017, 21(5): 450-453.

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摘要: 核糖体蛋白(ribosomal proteins, RPs)不仅在细胞内参与合成蛋白质, 还具有多种核糖体外功能。核糖体蛋白S26 (RPS26)位于核糖体小亚基, 其功能障碍与多种疾病密切相关。近年来, 有关RPS26的研究主要在参与核糖体装配等核糖体功能方面, 以及参与无义介导的mRNA降解机制(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)、直接或间接调控重要的抑癌基因p53表达等核糖体外功能方面。多篇报道证实RPS26基因突变可引起戴-布二氏贫血(Diamond-Blackfan anemia, DBA), 而RPS26基因与Ⅰ型糖尿病的关系仍有争议。探索RPS26参与NMD机制在DBA发生中的作用有助于深入认识DBA发病机理, 同时也可为完善SMaRT (spliceosome-mediated mRNA trans-splicing)技术等基因疗法提供帮助。此外, RPS26在癌症中的作用也值得进一步探索。

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灵芝三萜合成调控与抗肿瘤药理活性的研究进展

闫舒雅, 吴左次, 辛根阳, 肖茜, 黄明敏, 孟祥贤

生命科学研究. 2017, 21(5): 454-457.

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摘要: 三萜类化合物是灵芝的重要药效成分之一, 是一类活性天然产物, 不仅在保肝、护肾、降血糖、抗缺氧等方面有着重要的应用价值, 而且还具有很好的抗肿瘤活性。现就灵芝三萜的发酵培养优化和抗肿瘤药理活性的研究进展进行综述, 以期为酸性和中性灵芝三萜类化合物的研究及进一步开发相应抗癌药物提供科学基础。

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虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物的研究进展

顾小辉, 魏建和, 王国全, 高志晖

生命科学研究. 2017, 21(5): 458-465.

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摘要: 昆虫对植物的取食活动可以激活植物的防御反应, 诱导植物通过调控自身的代谢网络合成防御性次生代谢产物, 抵御外界不良刺激。虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物及其机制研究已成为近年来的研究热点之一。现对虫害诱导的植物防御性次生代谢产物、昆虫危害产生的各类激发子、植物对激发子的识别、虫害应答相关的信号转导通路及其对次生代谢物质积累的调控进行了综述, 可为虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物的机制研究提供参考, 为植物虫害防治研究、植物次生代谢物质的生产和利用提供理论依据。

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蜕膜自然杀伤细胞在正常妊娠中作用的研究进展

廖娥, 邵勇

生命科学研究. 2017, 21(5): 466-470.

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摘要: 蜕膜自然杀伤(decidual natural killer, dNK)细胞是存在于母胎界面并与胎儿滋养层细胞密切接触的免疫细胞。近年来的研究发现, 正常妊娠过程离不开dNK细胞分泌的相关因子的作用, 如母胎耐受、子宫螺旋动脉重铸、血管形成等。现主要综述了近年来dNK细胞参与子宫螺旋动脉重铸及血管形成等方面的研究, 以及dNK在维持正常妊娠中的可能作用机制。

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2017年, 第21卷, 第5期　
刊出日期：2017-10-31

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