潘润华, 阿斯楞, 张 茂, 利 民, 张梓朗, 廖彩仙
生命科学研究. 2016, 20(2): 113-118.
摘 要: 骨髓间充质干细胞具有分化成为肝细胞的潜能已得到证实, 但其分化的调控机理还不完全清楚。通过检测大鼠骨髓源性肝干细胞(rat bone marrow-derived liver stem cells, RBMLSCs)诱导分化为肝细胞过程中OCT4启动子甲基化的变化, 来探讨启动子甲基化调控细胞分化的机制。RBMLSCs用25 μg/L重组人肝细胞生长因子和0.1 nmol/L地塞米松进行诱导, 在诱导之后不同时间点(0 d, 7 d, 14 d)提取细胞的DNA及RNA。用荧光定量PCR法检测白蛋白(albumin, Alb)和OCT4的 mRNA表达水平, 应用焦磷酸测序法定量检测OCT4基因的启动子中4个CpG位点的甲基化变化。结果表明: 在RBMLSCs分化过程中, Alb mRNA持续增高(P<0.05), 但OCT4 mRNA表达在7 d及14 d明显减少(P<0.005); 同时OCT4启动子上游的CpG 1-2-3甲基化频率显著上升(P<0.001), 但CpG 4甲基化无明显变化。这些结果说明OCT4启动子高甲基化可能导致其mRNA表达减少, RBMLSCs多能性消失, 但CpG 4并不参与这一分化调控过程。